ハイブリドーマ細胞株が産生するマウスモノクローナル抗体のクラスあるいはサブクラス(IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgM、IgA)及びL鎖(λ鎖、κ鎖)、ラットモノクローナル抗体のクラスあるいはサブクラス(IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c、IgM)及びL鎖(κ鎖)を確認するための検査です。
1. 準備するもの
(1) 検体
- マウスハイブリドーマ細胞株の培養上清
- ラットハイブリドーマ細胞株の培養上清
(2) 機器等
- マイクロチューブ
(3) 試薬
- Mouse Monoclonal Antibody Isotyping Test Kit(カタログ番号MMT1)Bio-Rad社
- Rat Monoclonal Antibody Isotyping Test Kit(カタログ番号RMT1)Bio-Rad社
- PBS(-)
2. 方法
- 検体50μlをマイクロチューブに採り、PBS(-)を450μl加え10倍に希釈してよく撹拌する。
- 希釈した検体150μlを展開チューブに入れる。
- 室温に30秒置いた後、軽くVortex撹拌し、展開チューブ中の試薬が溶解したことを確認する。
- ストリップの赤い端を下にして展開チューブに入れる。
- 裏表ともに青い陽性コントロールバンドが現れたら、ストリップを取り出す。
3. 判定
各クラスあるいはサブクラス及びL鎖を、目視により判定する。
例:マウス IgG2aκ
表)
裏)